檢查白喉棒狀桿菌異染顆粒的方法主要包括直接涂片鏡檢和特殊染色技術,其中Albert染色是最常用的方法。直接涂片鏡檢通過顯微鏡觀察細菌形態(tài),而Albert染色則能清晰顯示異染顆粒的存在,幫助確診白喉。
1、直接涂片鏡檢:這是初步篩查白喉棒狀桿菌的常用方法。取患者咽部或鼻腔分泌物制成涂片,經革蘭染色后,在顯微鏡下觀察。白喉棒狀桿菌呈革蘭陽性,形態(tài)為細長、略帶彎曲的棒狀,排列不規(guī)則。若發(fā)現此類細菌,需進一步確認。
2、Albert染色:這是檢測異染顆粒的關鍵技術。異染顆粒是白喉棒狀桿菌的特征性結構,富含多磷酸鹽,染色后呈深藍色或黑色,與菌體其他部分形成鮮明對比。染色步驟包括:涂片固定后,先用AlbertA液染色1分鐘,水洗;再用AlbertB液染色30秒,水洗;最后用95%乙醇脫色,顯微鏡下觀察。異染顆粒的存在可輔助診斷白喉。
3、其他染色方法:除了Albert染色,Neisser染色和Loeffler染色也可用于檢測異染顆粒。Neisser染色使用甲基藍和俾斯麥棕,異染顆粒呈深藍色;Loeffler染色則使用亞甲藍和堿性品紅,異染顆粒呈深紫色。這些方法在特定情況下可作為補充手段。
4、培養(yǎng)鑒定:若染色結果可疑,需進行細菌培養(yǎng)以進一步確認。將標本接種于Loeffler血清斜面或Tellurite血瓊脂平板,37℃培養(yǎng)24-48小時。白喉棒狀桿菌在Loeffler血清斜面上形成灰白色菌落,在Tellurite血瓊脂平板上形成黑色或灰色菌落。培養(yǎng)后再次進行染色鏡檢,可提高診斷準確性。
5、分子生物學檢測:對于疑難病例,可采用PCR技術檢測白喉棒狀桿菌的毒素基因tox基因。該方法靈敏度高,特異性強,可快速確診白喉,尤其適用于早期診斷和流行病學調查。
檢查白喉棒狀桿菌異染顆粒的方法多樣,結合直接涂片鏡檢、特殊染色技術、培養(yǎng)鑒定和分子生物學檢測,可提高診斷的準確性和效率。Albert染色是檢測異染顆粒的首選方法,操作簡便,結果直觀,但在實際應用中需結合其他方法進行綜合判斷。早期診斷和治療對控制白喉的傳播和預后至關重要,醫(yī)務人員應熟練掌握相關檢測技術,為患者提供及時有效的診療服務。
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